Untersuchungen zur Abtötung der Dörrobstmotte Plodia interpunctella und des Brotkäfers Stegobium paniceum mit Kälte bei –10°C, –14°C und –18°C

Studies to control the Indianmeal moth Plodia interpunctella and the drugstore beetle Stegobium paniceum with subzero temperatures of –10°C, –14°C and –18°C

Einleitung

Die Dörrobstmotte Plodia interpunctella (Hübner) und der Brotkäfer Stegobium paniceum (L.) sind zwei der meistverbreiteten Schadinsekten auf Trockenfrüchten, Nüssen, Getreideprodukten, Früchtetees und Gewürzen. Wenn die Produkte im Freien getrocknet werden, kann man einen Insektenbefall schwer vermeiden. Für Jahrzehnte war die Begasung im Lager oder in Verarbeitungsbetrieben die übliche Bekämpfungsmethode. Nachdem Methylbromid weltweit vom Markt genommen wurde, nahm die Abhängigkeit von Phosphorwasserstoff stark zu. Gleichzeitig führten Berichte über die Resistenz von vorratsschädlichen Insekten einiger Arten gegen Phosphorwasserstoff (Chaudry, 1999; Collins, 2006) zu Bedenken und verstärkten die Suche nach Bekämpfungs­alternativen für die Gase.

Künstliches Kühlen und Ausfrieren sind von diversen Autoren als mögliche Schädlingsbekämpfungsmaßnahme beschrieben worden (David et al., 1977; Evans, 1987; Fields, 1992; Hagstrum und Flinn, 1994; Lasseran und Fleurat-Lessard, 1990; Dohino et al., 1999; Burks et al., 2000; Adler, 2010). Frosten trockener Vorräte auf –10°C bis –20°C kann als eine Option zur schnellen Schädlingsbekämpfung hochwertiger Vorratsgüter angesehen werden. Zwar ist diese Methode schnell wirksam, hinterlässt keine chemischen Rückstände in den behandelten Gütern, hat keine oder nur geringe nachteilige Effekte auf die Warenqualität und ist vergleichsweise sicher für die Arbeiter. Die hohen Energiekosten für die Kühlung sind jedoch ein Nachteil, der einer Verbreitung dieser Technik derzeit entgegensteht. Eine Firma, die mit organisch produzierten Trockenfrüchten in der Türkei, den USA und in Deutschland handelt, behandelt jede Warenpartie vor der Weiterverarbeitung für 24 h in einer Kältekammer bei –20°C. Auch ein deutscher Hersteller von Früchtetees und Gewürzen setzt seit 15 Jahren eine Kühlkammer ein, um alle ankommenden Produkte einer Eingangsbehandlung zu unterziehen, bis das Zentrum der Ware auf –18°C abgekühlt ist (Abb. 1). Die Kühlung erfolgt in diesem Fall durch Einführung von Flüssigstickstoff, wobei die Kammertemperatur bis auf –80°C absinken kann. Je nach Menge der Ware, Maß und der in Ballen gelagerten Produkte wird für 12 h bis 36 h gefrostet. Der Produktart und der Behandlungszeit entsprechend, werden 3 m³ bis 5 m³ flüssigen Stickstoffs für eine Behandlung eingesetzt. Die Kosten werden auf etwa 1000 €/t geschätzt (Tallafus, Fa. Guttroff, persönliche Mitteilung).

Abb. 1. Gedämmte Tiefkühlkammer der Firma Guttroff zum Frosten insbesondere von Tee und Gewürzen gegen vorratsschädliche Insekten; seit 1993 in Be­trieb; gesackte Ware auf fahrbarem Gestell zum Befüllen der Kammer; Zieltemperatur im Kern der Ware –18°C; Einwirkzeit 12 Stunden bis 36 Stun­den (je nach Wärmeleitfähigkeit des Produkts); ca. 3 m³ bis 5 m³ Flüssigstickstoff oder flüssige Luft pro Behandlung mit zeitweilig –80°C außerhalb der Ware; Kosten bei ca. 1000 €/t; Zulassung nach Pflanzenschutzgesetz nicht erforderlich.

Das Ziel der vorliegenden Studie war die Ermittlung der letalen Einwirkzeiten für alle Entwicklungsstadien von P. interpunctella und S. paniceum bei tiefen Temperaturen von –10°C, –14°C und –18°C.

Material und Methoden

Die Testinsekten wurden vor Versuchsbeginn nicht an tiefe Temperaturen adaptiert. Bei der Vorbereitung der Versuchsproben wurden Eier, Larven, Puppen und Ima­gines in getrennte Käfige eingezählt.

Dörrobstmotte. Imagines legten frische Eier in einem Ei­ablagegefäß. Ungefähr 500 Eier der Dörrobstmotte wurden wöchentlich auf eine Mischung aus 500 ml Weizenkleie und etwa 15 g Mandelbruch aufgesetzt, um die verschiedenen Entwicklungsstadien der Motten in mehreren Wochen in ausreichender Menge bereitzustellen.

50 bis zwei Tage alte Motteneier wurden in kleine Glasgefäße (Ø: 11 mm, Länge: 15 mm) eingezählt, die auf einer Seite mit einer aufgeklebten Nylongaze mit 0,2 mm Maschenweite und auf der anderen Seite mit einem Gummistopfen verschlossen wurden. Diese kleinen Glasgefäße wurden auf 5 ml Weizenkleie in kleine runde Drahtgazekäfige platziert (Ø: 16 mm, Länge: 50 mm) (Abb. 2), um dieselben geometrischen Abmessungen wie bei den Käfigen der anderen Stadien herzustellen.

Abb. 2. 50 Brotkäfereier auf schwarzem Filzstoff in klei­nen Glas­gefäßen (Ø 13 mm, Länge 15 mm), auf der Unterseite mit einer auf­geklebten Nylongaze mit 0,2 mm Maschenweite und auf der anderen Seite mit einem Gummistopfen verschlossen (rechts im Bild); für die Kältebehandlung wurden diese Glasgefäße in kleine runde Draht­gazekäfige (Ø 16 mm, Länge: 50 mm) mit 5 ml Weizenkleie gegeben. Diese Drahtgazekäfige wurden auch für Larven, Puppen und Imagines der Brotkäfer und die Brutstadien der Motte verwendet.

Auf diese Weise waren die Eier zur späteren Bestimmung der Schlupfrate getrennt vom Futtersubstrat. Schlüpfende Larven konnten durch die feinen Öffnungen in der Gaze kriechen und an der Kleie fressen. Die Wärmeisolierung war dadurch ähnlich wie bei den Proben mit den anderen Insektenstadien. 50 etwa vier Wochen alte Mottenlarven mit 5 ml Weizenkleie kamen direkt in Gaze­käfige. So wie für die Larven geschildert, wurden auch 50 etwa sechs Wochen alte Puppen mit Substrat in Käfige gezählt. 50 Junge Falter ohne Substrat in weiten Glas­gefäßen mit 40 mm Durchmesser und 105 mm Länge, an den Enden mit Baumwolltuch und Gummibändern verschlossen, dienten als Proben für dieses Entwicklungs­stadium (Abb. 3).

Abb. 3. Je 50 Testfalter der Dörrobstmotte in Glasgefäßen, oben quer die unbehandelten Kontrollen, unten zwei Tage nach der Kälteexposition bei –14°C für 10 min, 30 min, 60 min, 120 min und 240 min (von li. nach re.). Verschluss beidseitig mit Baum­wollstoffbindung und Gummibändern.

Brotkäfer. Etwa 200 Imagines des Brotkäfers wurden zur Eiablage für zwei Wochen auf 150 ml Weizenkleie gesetzt. Nach Entnahme der Käfer wurden weitere 200 ml Weizenkleie und ein getrocknetes Brötchen hinzu gegeben.

50 bis zu einem Tag alte Eier des Brotkäfers wurden in ein Glasröhrchen (Ø: 11 mm, Länge: 15 mm) gezählt, das auf der einen Seite mit 0,3 mm-maschiger Nylongaze – bedeckt mit schwarzem Filz – und auf der anderen mit einem Gummistopfen verschlossen wurde (Abb. 2, rechts). Wie bei den Motteneiern wurden die Gläser in einen Drahtgazekäfig mit etwas Substrat gegeben. Je 50 Larven und Imagines wurden mit 5 ml Weizenkleie in einen später – wie oben beschrieben – verschlossenen Draht­gazekäfig gegeben (Abb. 2). Die Puppen des Brotkäfers sind sehr empfindlich gegen mechanischen Stress, wenn sie z.B. zum Auszählen aus den Verspinnungen entfernt werden. Deshalb wurden zur Puppengewinnung je 80 bis zu drei Tage alte Eier auf 5 ml Substrat in einen Draht­gazekäfig eingezählt. Die Käfige blieben vor dem Versuchseinsatz für ca. sechs Wochen bei 25°C und 65% rel. Feuchte, bis sich die Mehrzahl der unbehandelten Kon­trolltiere in Puppen entwickelt hatte. Ohne weiteres Zählen der Puppen gelangten diese Käfige in die Untersuchungen. Nach der Exposition wurden schlüpfende Käfer in den geöffneten Käfigen als Überlebende gewertet. Die Versuche mit Puppen wurden im Gegensatz zu den anderen Versuchen neunmal wiederholt, die dazugehörigen unbehandelten Kontrollproben umfassten zwischen 9 und 18 Wiederholungen.

Abb. 4. Tablett mit fünf Testprobensätzen und zwei Data­loggern für die Kältebehandlung im Laborkühl­schrank Rumed 3501.

Folgende Bedingungen wurden mit biologischen Proben untersucht:

bei –10°C: Einwirkzeiten: 30, 60, 120, 240 und 480 Minuten,

bei –14°C: Einwirkzeiten: 10, 30, 60, 120 und 240 Minuten und

bei –18°C: Einwirkzeiten: 5, 10, 30, 60 und 120 Minuten.

Die Proben wurden nach den jeweiligen Einwirkzeiten aus dem Kühlschrank genommen.

Motten. Die kleinen Käfige mit Motteneiern wurden nach der Behandlung in kleine Glasgefäße mit 2 ml Weizenkleie gegeben, die anschließend mit insektendichter Plastikkappe aber nicht gasdicht verschlossen wurden. Larvenschlupf aus diesen Eiern wurde als Überlebende gezählt. Kam es dagegen zu einer dunklen Verfärbung und zum Schrumpfen der Eier durch Wasserverlust, wurde dies nach sieben Tagen bei 25°C und 65 ± 5% rel. Feuchte als Mortalität gewertet. Larven und Weizen­kleie wurden in Petrischalen deponiert. Puppen und ihr Substrat wurden jeweils in 200 ml Schraubdeckelgläser überführt. Bei Larven- und Puppenproben wurde jeweils der Falterschlupf zahlenmäßig erfasst. P. interpunctella Imagines blieben nach der Entnahme der Proben aus dem Kühlschrank in den mit Stoff verschlossenen Glas­gefäßen. Alle adulten Testtiere wurden nach der Behandlung bei 25°C und 65 ± 5% rel. Feuchte gehalten und nach zwei Tagen auf Überlebende untersucht.

Brotkäfer. Eier des Brotkäfers wurden nach der Behandlung in kleine Petrischalen mit 35 mm Durchmesser überführt. Zur Validierung der Ergebnisse der Unter­suchungen der Käfereier wurden weitere fünf Wieder­holungen angesetzt. Die Anzahl der unbehandelten Kontrollproben wurde auf insgesamt 17 gesteigert. Ohne Zugabe weiteren Substrats wurden sie nach sieben und 14 Tagen bei 25°C und 65 ± 5% rel. Feuchte auf Larvenschlupf untersucht und die Larven gezählt. Im Falle der unbehandelten Kontrollproben wurden je 50 Eier direkt in kleine Petrischalen gezählt.

Larven wurden samt Substrat in kleine Petrischalen überführt und nach zwei und sieben Tagen auf Über­lebende untersucht (Abb. 5). Da das Auszählen von Puppen vor den Versuchen zu hoher Mortalität geführt hatte, wurde über das Einzählen von 80 Eiern in Käfige, Vergleich mit der Entwicklung in unbehandelten Proben und entsprechend langes Warten ein eigenes Versuchsprogramm mit neun Wiederholungen für die getesteten fünf Einwirkzeiten bei den drei Temperaturen entwickelt. Die Puppen wurden nach Versuchsende vorsichtig mit dem Substrat aus den Käfigen genommen und in 200 ml Gläser mit Weizenkleie umgesetzt. Nach sieben und 14 Tagen wurden diese Proben auf geschlüpfte Imagines untersucht und zahlenmäßig erfasst.

Abb. 5. Larven des Brotkäfers, unbehandelte Kontrolle und nach letaler Kältebehandlung, jeweils 2 Tage nach Versuchsende.

Alle Versuchsergebnisse wurden im Verhältnis zu den lebenden Tieren in unbehandelten Kontrollproben in Mortalitätsprozente umgerechnet, wobei eine Korrektur nach Abbott (1925) für die abgestorbenen Tiere in der unbehandelten Kontrolle durchgeführt wurde. Für S. paniceum wurden die Mittelwerte und Standardabweichungen errechnet und graphisch aufgetragen.

Mit den Ergebnissen für P. interpunctella wurden Regressionen für alle getesteten Bedingungen und Stadien durchgeführt und die Lt₁₀₀ für diese Bedingungen berechnet (Tab. 1).

Die hier als Lt₁₀₀ bezeichnete letale Dosis bezieht sich nach den Versuchsanstellungen jeweils auf 150 oder auch mehr Individuen. Streng genommen kann mit dieser Anzahl nur etwa eine 99%-ige, bzw. – wenn alle fünf getesteten Zeiten und die dreimalige Wiederholung einbezogen werden – maximal eine 99,9%-ige letale Dosis bestimmt werden. Die Daten wurden gegen die getesteten Temperaturen aufgetragen. Für die Abhängigkeit der Lt₁₀₀ von der Temperatur im Bereich von –10°C bis –18°C wurden für die einzelnen Präimaginalstadien gut beschreibende e-Funktionen durch Excel berechnet. Mit TableCurve wurde auch für die Imagines eine entsprechende, etwas kompliziertere Funktion für die Abhängigkeit der Lt₁₀₀ von der Temperatur berechnet.

Ergebnisse

Abb. 6. Mittlere Mortalität mit Standardabweichungen der drei Entwicklungs­stadien und Ima­gines des Brotkäfers Stegobi­um paniceum nach Ex­position bei -10°C; drei Wiederholungen mit je 50 Individuen.

Abb. 7 enthält die Ergebnisse der Untersuchungen bei –14°C. Wiederum war für die Larven und Eier mit zu­nehmender Einwirkzeit eine Zunahme der Mortalität zu beobachten. Die Käfer hielten mit nur ca. 6% Mortalität dieser Kälte eine Stunde lang stand. Weitere Exposition führte nach 240 Minuten bei Larven, Puppen und Ima­gines zu vollständiger Abtötung der jeweils eingesetzten Versuchstiere. Ca. 10% der Eier überlebten 240 Minuten Einwirkzeit bei dieser Temperatur.

Abb. 7. Mittlere Mortalität mit Standardabweichungen der drei Entwicklungs­stadien und Ima­gines des Brotkäfers Stegobi­um paniceum nach Ex­position bei -14°C; drei Wiederholungen mit je 50 Individuen, bei Ver­suchen mit Puppen 9 Wiederholungen.

Weitere Abkühlung auf –18°C führte in wesentlich kürzerer Einwirkzeit von 60 Minuten zu fast vollständiger Abtötung aller Individuen aller getesteten Stadien des Brotkäfers (Abb. 8). Bei kürzeren Einwirkzeiten waren wieder die Imagines das widerstandsfähigste Stadium, das auch nach 30 Minuten noch zu ca. 60% überlebte. Larven, Puppen und Eier starben nach dieser Einwirkzeit zu 99%, 85% bzw. 80% ab. Nach einer Stunde waren alle Testtiere der verschiedenen Stadien bis auf nur ca. 2% der Eier tot. Die Verlängerung der Einwirkzeit um wei­tere 60 Minuten erhöhte die Abtötung der Eier um ein weiteres Prozent.

Abb. 8. Mittlere Mortalität mit Standardabweichungen der drei Entwicklungs­stadien und Ima­gines des Brotkäfers Stegobi­um paniceum nach Ex­position bei -18°C; drei Wiederholungen mit je 50 Individuen, bei Ei­versuchen 12 Wieder­holungen, bei Puppenversuchen 9 Wiederholungen.

Fazit: Bei –10°C reichte die längste getestete Einwirkzeit von 480 Minuten nicht zur Abtötung der Imagines und Entwicklungsstadien des Brotkäfers aus. Puppen waren am empfindlichsten, Imagines am widerstands­fähigsten.

Bei –14°C führten 240 Minuten Einwirkzeit zur Abtötung aller Larven, Puppen und Imagines, die 120 Minuten alle noch in geringen Zahlen überlebt hatten. Einige Eier überlebten auch 240 Minuten Einwirkzeit bei dieser Temperatur.

Eine Stunde Einwirkzeit bei –18°C reichte zur Abtötung von Larven, Puppen und Imagines dieses Käfers aus. Auch nach 120 Minuten Einwirkzeit blieb die Abtötung der Eistadien in Einzelfällen unvollständig. Während bei sechs Versuchsdurchläufen bereits 60 Minuten zu 100% Mortalität führten, überlebten einzelne Individuen in zwei Fällen auch 120 Minuten.

Diese Zeiten verkürzten sich bei Anwendung von –14°C auf 283 Minuten für die Eier, 145 Minuten für die Larven, 97 Minuten für die Puppen und nur 37 Minuten für die Imagines. –18°C waren am effektivsten von den drei getesteten Temperaturen. Eine halbe Stunde reichte für die Abtötung der Imagines aus. Die anderen Stadien widerstanden in der gleichen Reihenfolge etwas länger: 34 Minuten die Puppen, 36 Minuten die Larven und 70 Minuten die Eier.

In Abb. 9 sind die Ergebnisse zur Lt₁₀₀ zusammen­gefasst wiedergegeben. Mit dem TableCurve-Programm wurde auch für die Imagines – wie mit Excel für die anderen Entwicklungsstadien der Dörrobstmotte – ein funktioneller Zusammenhang ermittelt: Lt_100Imago [min] = a + b e^Temperatur; mit a = 28,4326 und b = 5038647 und dem Regressionskoeffizienten r² = 0,99885. Die logarithmische Darstellung der Lt₁₀₀ gegen die Temperatur zeigt den nach der Ordinatentransformation linearen Zusammenhang für die Präimaginalstadien.

Abb. 9. Letale Einwirkzeit (Lt₁₀₀) für eine voll­ständige Abtötung (100%) aller eingesetz­ten Individuen bei –10°C, –14°C und –18°C für alle Entwicklungs­stadien der Dörrobst­motte Plodia interpunctella; von Excel angegebene und in der Abbildung wie­dergegebene Funktio­nen (Geraden im logarithmischen Maß­stab der Ordinate) für den linearen Zusam­menhang zwischen Lt₁₀₀ und tiefer Expo­sitionstemperatur für drei Stadien im geprüf­ten Temperaturbereich.

Bei –10°C wurden die Stadien von P. interpunctella mit der längsten untersuchten Einwirkzeit von 8 Stunden nahezu abgetötet. In einer der drei Wiederholungen überlebten ein paar Eier. Deshalb sollten wahrscheinlich 10 bis 12 Stunden sichere Behandlungszeiten sein. Sicherheitshalber sollte dies aber vorher durch Experimente untermauert werden. Die Kälteadaptation kann die Kältetoleranz wesentlich vergrößern. Für jedes Entwicklungsstadium kann dieser Effekt unterschiedlich stark aus­fallen. Unter ähnlichen Bedingungen fanden Fields und Timlick (2010), dass das fünfte Larvenstadium von P. interpunctella nach 48 Stunden Einwirkzeit bei –10°C zu 2% überlebte. Bei Kälteadaptation und Diapause erhöhte sich dieser Prozentsatz auf 12% nach 14-tägiger Exposi­tion.

Stark kontrastierten zu diesen Daten mit der Dörrobstmotte die mit dem Brotkäfer bei –10°C erzielten Ergebnisse; Imagines waren dabei am widerstandsfähigsten. Für dieses Stadium war keine offensichtliche Abhängigkeit zwischen Einwirkzeit und Mortalität erkennbar. In zwei von drei Proben trat nach 480 Minuten bei –10°C keinerlei Mortalität auf! Die Mortalität bei den Ei- und Larvenstadien des Brotkäfers nahm dagegen deutlich mit der Einwirkzeit zu (Abb. 6). Daraus kann geschlossen werden, dass für eine vollständige Abtötung dieses Käfers bei –10°C deutlich längere Einwirkzeiten erforderlich sind. Ryan (1995) berichtete über Kühlbehandlungen von Tabak gegen den Tabakkäfer Lasioderma serricorne (F.), einem engen Verwandten des Brotkäfers. Er beschrieb vollständige Abtötung des Tabakkäfers bei –10°C nach 28-tägiger Behandlung. Aus Literaturdaten berechneten Reichmuth et al. (2007) für den Tabakkäfer eine letale Einwirkzeit von 18–20 Tagen bei –10°C.

Bei –14°C zeigten sich die Eier der Dörrobstmotte – wie bei den anderen Temperaturen auch – als besonders widerstandsfähig (Tab. 1). Nach 240 Minuten Einwirkzeit galt das auch für die Eier des Brotkäfers (Abb. 7). Eier von P. interpunctella besaßen nach Untersuchungen von Carrillo und Cannon (2005) mit –24°C den tiefsten Superkühlpunkt „supercooling point“ aller Stadien. Nach allen getesteten kürzeren Einwirkzeiten als 240 Minuten waren die Imagines des Brotkäfers z.B. mit ca. 29% Überlebenden nach 120 Minuten bei dieser Temperatur widerstandsfähiger als die Puppen mit ca. 7% Überlebenden, die Eier mit ca. 16% Überlebenden und auch die Larven mit ca. 3% Überlebenden (vgl. Abb. 7). Nach 240 Minuten Kühlung veränderte sich die Reihenfolge der Widerstandsfähigkeit, alle Larven, Puppen und Imagines waren tot und ca. 10% der Eier (Abb. 7) überlebten. Dieses Ergebnis mag darauf hinweisen, dass mehrere verschiedene Faktoren den Kältetod der einzelnen Entwicklungsstadien von Insekten verursachen.

–18°C führten in 70 Minuten zum Tod der Eier von P. interpunctella. Die übrigen Stadien dieser Mottenart starben bereits nach etwa der Hälfte dieser Zeit ab. Eier des getesteten Käfers überlebten die 60-minütige Behandlung bei dieser Temperatur zu ca. 2%. Auch die längste, bei dieser Temperatur untersuchte Einwirkzeit von 120 Minuten überlebte noch etwa 1% der Versuchstiere. Mit noch weiteren Untersuchungen kann die Lt₁₀₀ besser bestimmt werden. Mehr als 50% der Käfer – mehr als jedes andere Stadium – überlebten eine 30-minütige Tiefkühlung bei –18°C. Bei längerer Einwirkzeit von 60 und 120 Minuten waren alle Käfer tot.

Dohino et al. (1999) verglichen den Tiefkühleffekt auf diverse vorratsschädliche Käfer und Motten einschließlich P. interpunctella. Auch bei ihnen erwiesen sich die Motteneier als besonders widerstandsfähig. Imai und Harada (2006) untersuchten Tiefkühlbehandlungen bei verschiedenen Temperaturen gegen den Tabakkäfer L. serricorne und fanden, dass bei –15°C Eier nicht kälte­adaptierter Käfer besonders widerstandsfähig waren und erst nach 5 Stunden Einwirkzeit abstarben. Dagegen beschrieben Abdelghany et al. (2010), dass Imagines und nicht Eier das kältewiderstandsfähigste Entwicklungs­stadium seien. Streuungen in der Kältewiderstandsfähigkeit von Insekteneiern könnten womöglich auch von deren Alter und innerem Entwicklungsgrad abhängen. Die Motteneier der vorliegenden Studie waren 0–24 Stunden alt und damit recht jung. Die Eier der Brotkäfer waren 0 bis drei Tage alt.

Aus den vorgestellten Ergebnissen kann geschluss­folgert werden, dass der Brotkäfer widerstandsfähiger gegen tiefe Temperaturen ist als die Dörrobstmotte. Verglichen mit den anderen Entwicklungsstadien erscheinen junge Eier besonders tolerant gegen niedrige Temperaturen von –10°C, –14°C und –18°C.

Tieffrosten mit flüssigem Stickstoff erscheint als besonders effektiv, weil dabei die äußeren Partien der gekühlten Ware noch tiefer abkühlen, bis im Zentrum der Ware die angestrebten –18°C erreicht sind. Messtechnische Erfassung der Temperaturcharakteristik beim Abkühlen und Aufwärmen zusammen mit eingebrachten und wieder entnommenen Tierproben unterstützt den Nachweis der Zuverlässigkeit dieser Methode zur Schädlingsbekämpfung.