Purificazione per cromatografia di affinità dell' enzima malico estratto da uva

Authors

  • P. Spettoli Istituto di Chimica Agraria e Industrie Agrarie, Universita di Padova, Italia
  • A. Bottacin Istituto di Chimica Agraria e Industrie Agrarie, Universita di Padova, Italia
  • A. Zamorani Istituto di Chimica Agraria e Industrie Agrarie, Universita di Padova, Italia

DOI:

https://doi.org/10.5073/vitis.1980.19.4-12

Abstract

L'enzima malico (E.C. 1.1.1.40) estratto dall' uva Raboso è stato purificato per cromatografia di affinità. Sono state determinate le principali caratteristiche e le proprietà cinetiche dell' enzima prima e dopo il passaggio su colonna di affinità. L'enzima è NADP-specifico e la sua attività richiede cationi bivalenti. L'estratto prima della purificazione per cromatografia di affinità presenta valori di Km per NADP+ e per Mg2+ rispettivamente di. 0,035 mM e di 0,42 mM ed ha comportamento allosterico verso l' acido L-malico; dall' equazione di HILL si è trovato un mM di 1,86 ed il corrispondente valore di S0,5 uguale a 1,25 mM. Dopo la purificazione l' enzima non aveva più proprietà allosteriche e le Km sono state 0,066 mM per il NADP+, 0,30 mM per Mg2+ e 2 mM per l' acido L-malico.

Purification of malic enzyme from grape berries by affinity chromatography

Malic enzyme (E.C. 1.1.1.40) from Raboso grape berries has been purified by affinity chromatography. Main characteristics and kinetic properties before and after affinity chromatography column have been examined. The enzyme is NADP- specific and it requires divalent cations. Before purification, the enzyme has Km values for NADP+ and Mg2+ of 0.035 mM and 0.42 mM respectively; it shows allosteric behaviour to malate. The HILL plot slope for malate is 1.86 and S0,5 is 1.5 mM. The purified malic enzyme doesn't exhibit allosteric properties and Km is 0.066 mM for NADP+, 0.30 mM for Mg2+ and 2 mM for malate.

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Published

2016-06-22

Issue

Vol. 19 No. 1 (1980): Vitis

Section

Article

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